本文標題："石臘選擇-細胞研究顯微鏡專賣門市"
發布者：yiyi ------ 分類: 站內動態 ------ 人瀏覽過 -----時間：2012-10-30 5:32:9
石臘選擇
概覽:
Calbiochem所建議的石臘切片單株和多株抗體可以在福馬林固定或石臘包埋組織切片中用來定位抗原。
溶液和試劑:
組織切片: 福馬林固定或石臘包埋切片(4到8微米厚)
使用蒸餾水制備0.1%的H2O2溶液并且每日更新。
蒸餾水
PBS (磷酸鹽生理食鹽水緩衝液): 將8 g NaCl、200 g KCl、1.44 g Na2HPO4和240 g KH2PO4溶于800 mL蒸餾水中。使用HCl將pH值調整為7.4。加入蒸餾水使溶液成為1公升。
按需求選擇預處理試劑(請參見下列的組織切片預處理步驟)
溶劑: 100%或95%乙醇; 二甲苯
步驟: 去石臘福馬林固定, 石臘包埋組織切片
在二甲苯溶液中去除石臘, 每次進行5分鐘且更換3次溶液。
在100%乙醇溶液中進行水合, 每次5分鐘且更換2次溶液。
在95%乙醇溶液中進行水合, 每次5分鐘且更換2次溶液。
在蒸餾水中進行潤洗
0.1% H2O2溶液中孵育30分鐘減緩內生過氧化酶活性。
在蒸餾水中進行潤洗。
在PBS中進行潤洗, 更換3次且每次進行5分鐘。
按要求的預處理步驟進行。
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