本文標題："細胞質對比染色結果太暗？一臺生物顯微鏡價格"
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問題: 對比染色結果太暗(在DAB和對比染劑間看不到應有的對比)
可能成因:
切片在蘇木紫溶液中停留時間太長。請減少孵育時間。
DAB的孵育不夠充分。請增加孵育時間。
請嘗試另一種組織對比染劑, 例如甲基綠。
將切片置于含有1%鹽酸(HCL, 濃度1 N)的70%酒精中直到染色變淡。
問題: 非預期(細胞質以及細胞核)的染色圖形
可能成因:
組織在酵素預處理步驟中被過度消化(over digested)。請減少孵育時間或使用的酵素濃度。
切片受到血清阻斷劑的不適當阻斷。請增加阻斷步驟的孵育時間或者使用的阻斷劑濃度。
使用過多初級抗體。請減少初級抗體的濃度。有可能和組織中次級抗體以及蛋白質間的交互反應現(xiàn)象。請將1%正常兔血清加入阻斷溶液中, 或者將次級抗體的用量減少3倍。
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