本文標題："生物百科-切片上棕色太深或者整個切片都呈現棕的原因"
發布者：yiyi ------ 分類: 站內動態 ------ 人瀏覽過 -----時間：2012-10-29 17:27:25
切片上棕色太深或者整個切片都呈現棕色
初級抗體濃度可能過高, 建議將濃度減少2 - 3倍。
載片在DAB溶液中的停留時間過長, 請縮短孵育時間。
組織受到不適當的阻斷。請增加阻斷血清(blocking serum)的孵育時間, 或者將它的濃度增加3倍。若使用BSA, 確定不含脂肪酸。
組織受到不適當的阻斷。請增加阻斷血清(blocking serum)的孵育時間, 或者將它的濃度增加3倍。若使用BSA, 確定不含脂肪酸。
兩次抗體孵育間的清洗步驟被縮短或者忽略。
使用雙氧水(H2O2)進行預孵育時, 沒有使用阻斷溶液。
H2O2過期, 應使用新試劑。
可能有發生次級抗體和組織蛋白質間的交互反應現象, 請加入下列二者或其中之一:
將1%的正常兔血清(Calbiochem目錄編號NS01L) 加入阻斷溶液中。
將0.01% TRITON® X-100 (Calbiochem目錄編號648462)加入初級抗體溶液中(注意: 這種作法也有可能減少一些抗體的專一鍵結)。
問題: 載片上發現碎片
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